1969. február 11-én született Sherman Oaksban, és New Yorkban nőtt fel.

A sokoldalú színésznőt fiatalon megbabonázta a színészet, apja, John Aniston lévén, aki éveken át főszereplője volt egy napi sorozatnak, amelynek "Days of our Lives" volt a címe. Nagy befolyást tett rá még néhai keresztapja, Telly Savalas, akit Kojak felügyelőként ismert meg a világ.

A görög származású Aniston gyermekkorában egy évig élt Görögországban családjával, de visszatért New Yorkba, amikor édesapja szerepet kapott a "Love of life" című sorozatban. Tizenegy évesen kóstolt bele először a színészetbe, amikor belépett a Rudolf Steiner Iskola drámakörébe.
"Engem mindig is megragadott a színjátszás, de élményeim a Rudolf Steiner Iskolában arra ösztökéltek, hogy karrierre törekedjek" - nyilatkozta Aniston, és hozzátette: "A Steiner egy szabadszellemű iskola volt, azért, hogy bátorítsa a kreativitást és az individualizmust."

 11 évesen bemutatták egyik festményét a new yorki Metropolitan Művészeti Múzeumban. A valódi tanulást a new yorki Előadóművészek Főiskoláján kezdte dráma szakon. Miután 1987-ben elvégezte, Aniston olyan off-Brodway előadásokban szerepelt, mint a "For Dear Life" a new yorki Közösségi Színházban, vagy a "Dancing on Checker's Grave". 1989-ben, megkapta első televíziós szerepét, a "Molloy" című sorozatban. Ezek után kisebb szerepeket is kapott a "The Edge","Ferris Bueller","Herman's Head", "Quantum Leap" illetve a "Burke's Law" című sorozatokban.

Jennifer általában különc és érdekes lányalakokat jelenít meg filmjeiben, akik függetlenek és nagyon eredetiek.

Ideje jelentős részét a művészetnek szenteli, fest és szénnel-agyaggal is dolgozik. Jelenleg Los Angelesben él férjével, Brad Pitt-tel, szeret túrázni-gyalogolni-sátorozni, szinte mindent, ami közelebb viszi őt a természethez.